背景

 腫瘤標(biāo)志物是指在惡性腫瘤的發(fā)生和增殖過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞本身所產(chǎn)生的或是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而異常產(chǎn)生和（或）升高的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因產(chǎn)物等，存在于患者的血液、體液、細(xì)胞或組織中，可用生物化學(xué)、免疫學(xué)及分子生物學(xué)等方法進(jìn)行測(cè)定，對(duì)腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、療效觀察、復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)以及預(yù)后評(píng)估具有一定的臨床診療價(jià)值。

熱門腫瘤標(biāo)志物

      MRD是指治療后體內(nèi)殘留的腫瘤細(xì)胞或者標(biāo)志物，通常的翻譯有3種，微小殘留病灶（Minimal Residual Disease）、可檢測(cè)殘留病灶（Measurable Residual Disease）、分子殘留病灶（Molecular Residual Disease）。
      現(xiàn)有的針對(duì)ctDNA的MRD檢測(cè)主要有2條技術(shù)路線：tumor-agnostic -assays(腫瘤未知分析)和tumor-informed assays(腫瘤知情/先驗(yàn)分析)，其中tumor-agnostic -assays僅對(duì)血漿檢測(cè)，利用的是固定的panel（一般為驅(qū)動(dòng)基因和靶向藥物基因，也會(huì)多組學(xué)方法）和分析方法對(duì)ctDNA做檢測(cè)，做分析，代表產(chǎn)品Guardant Health公司的Guardant Reveal；tumor-informed assays需要對(duì)原發(fā)腫瘤組織進(jìn)行測(cè)序（一般為WES），來(lái)鑒定患者的特異基因組變異圖譜，然后再定制個(gè)性化的panel，針對(duì)ctDNA做檢測(cè)，也就是說(shuō)需要對(duì)組織和血漿都做檢測(cè)，代表產(chǎn)品為Natera公司的Signatera。
 

     MRD技術(shù)難度很大的一個(gè)方面是對(duì)超低頻突變的檢測(cè)能力和穩(wěn)定性，以非小細(xì)胞肺癌為例，在早期NSCLC患者血漿中位cfDNA的濃度為7.69 ng/mL，換算在10 mL血漿(20ml全血)中含有大概20,000個(gè)單倍體基因組（3.3pg），考慮到cfDNA建庫(kù)時(shí)的損耗以及至少存在2條相同的變異基因序列，10 mL血漿中ctDNA檢測(cè)到的極限分子信號(hào)為0.02%水平，另外, 從TRACERx研究數(shù)據(jù)推算, 在1 cm3體積的腫瘤情況下, 10 mL血漿中大概含有2條腫瘤來(lái)源DNA分子。因此, 在NSCLC中進(jìn)行MRD檢測(cè)時(shí), 該檢測(cè)方法必須可穩(wěn)定檢測(cè)出豐度≥ 0.02%的ctDNA。這里有個(gè)重要的技術(shù)策略，就是Sample Level的策略，對(duì)于Site level的0.02%甚至更低，可以通過(guò)Samples Level來(lái)提高靈敏度。