穩(wěn)定細胞株構(gòu)建
▏ 服務背景
穩(wěn)定細胞株構(gòu)建是指將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉(zhuǎn)染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選。最常用的真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選,篩選得到可穩(wěn)定表達目的蛋白,或者穩(wěn)定表達沉默特定基因的細胞株。
穩(wěn)定細胞株的構(gòu)建周期長、難度大,每一步都很關鍵,尤其是細胞轉(zhuǎn)染,常用物理方法(電轉(zhuǎn))、化學方法(脂質(zhì)體等)、生物方法(病毒),根據(jù)不同的實驗條件,選擇最好的方法,來達到實驗目的。
▏ 服務原理
穩(wěn)定細胞株構(gòu)建的基本原理是用基因?qū)牍ぞ呋蚧蚓庉嫻ぞ?,改造原始細胞基因組,使改造后的細胞具有某些特定表型,并經(jīng)過抗性篩選或其他篩選方法,使其表型能長期傳代穩(wěn)轉(zhuǎn)。
▏ 服務優(yōu)勢
·科佰擁有龐大的母細胞庫和數(shù)據(jù)庫資源,熟悉細胞特性。
·多樣而靈活的基因?qū)牒途庉嫻ぞ摺?br />
·豐富的構(gòu)建經(jīng)驗和成功案例。
· 快速高效的開發(fā)流程。
·嚴格的檢測和質(zhì)控。
·銜接穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株應用方法開發(fā)與優(yōu)化。
·提供全流程和完整系統(tǒng)的開發(fā)。
▏ 平臺介紹
科佰生物在穩(wěn)定細胞株構(gòu)建上擁有豐富的經(jīng)驗,熟悉每一步操作,尤其對關鍵步驟有獨到的經(jīng)驗,成功為眾多科研客戶構(gòu)建目的細胞株(過表達、可誘導過表達、沉默、可誘導沉默、報告基因等等)。
▏ 服務流程