▏ 基因編輯介紹

基因編輯（gene editing），又稱基因組編輯（genome editing）或基因組工程（genome engineering），是一種新興的比較精確的能對生物體基因組特定目標基因進行修飾的一種基因工程技術或過程。

早期的基因工程技術只能將外源或內源遺傳物質隨機插入宿主基因組，基因編輯則能定點編輯想要編輯的基因。基因編輯依賴于經過基因工程改造的核酸酶，也稱“分子剪刀”，在基因組中特定位置產生位點特異性雙鏈斷裂（DSB），誘導生物體通過非同源末端連接（NHEJ）或同源重組（HR）來修復DSB，因為這個修復過程容易出錯，從而導致靶向突變。這種靶向突變就是基因編輯。

基因編輯以其能夠高效率地進行定點基因組編輯， 在基因研究、基因治療和遺傳改良等方面展示出了巨大的潛力。

▏ 案例展示

 科佰生物利用基因編輯的方法，成功獲得多種MET Ex14跳躍的標準品，表現(xiàn)為在DNA層面出現(xiàn)剪切變異，在RNA層面出現(xiàn)14外顯子的缺失，部分產品羅列如下：

表1. 部分MET Ex14跳躍突變的產品

檢測數據如下（以c.3028+1_c.3028+9del為例，更多數據請查看m.520jianting.com）

AI-Edigene® MET Splice Site Mutation（c.3028+1_c.3028+9del）Reference Standard

Fig 1. DNA的sanger測序顯示c.3028+1_c.3028+9del


Fig 2. RNA的sanger測序發(fā)生14外顯子的缺失


Fig 3. DNA的ddPCR檢測，顯示突變頻率為100%


Fig 4. RNA的ddPCR檢測，顯示拷貝數為1315.07 copies/ng

如上數據可知，不僅僅在DNA層面發(fā)生了剪切變異，在RNA層面也發(fā)生了變異，而且根據ddPCR的拷貝數數據顯示，MET表達也大大增加了。


科佰生物在使用基因編輯技術定制定點突變、插入、缺失、融合上有豐富的經驗，歡迎大家一起溝通討論。