I. Background
腫瘤細(xì)胞可以借助免疫檢查點(diǎn)受體逃避機(jī)體免疫系統(tǒng)的識(shí)別和殺傷，因此阻斷免疫檢查點(diǎn)受體可能是一種廣泛有效的腫瘤免疫治療方法。目前，抗PD-1/PD-L1抗體雖然比較成熟，與抗CTLA4抗體類似，但由于存在耐藥性，患者的總體有效率較低，因此尋找新的腫瘤免疫治療靶點(diǎn)迫在眉睫。 Programmed Cell Death Protein 1 (PD-1)，一種在激活的 T 細(xì)胞上表達(dá)的受體，與其配體 PD-L1 和 PD-L2 結(jié)合，負(fù)向調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。 PD-1 配體存在于大多數(shù)癌癥中，PD-1:PD-L1/2 相互作用會(huì)抑制 T 細(xì)胞活性，并使癌細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視。 PD1/PDL1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是腫瘤免疫抑制的重要組成部分，可以抑制T淋巴細(xì)胞的興奮，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的免疫耐受，從而實(shí)現(xiàn)腫瘤免疫逃逸。綜上所述，PD1與PDL1結(jié)合可以減弱T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫監(jiān)視，導(dǎo)致免疫反應(yīng)缺失，甚至導(dǎo)致T細(xì)胞凋亡。PD1/PDL1 抑制劑可解除抗腫瘤 T 細(xì)胞的免疫抑制，從而導(dǎo)致 T 細(xì)胞增殖并滲透到腫瘤微環(huán)境中并誘導(dǎo)抗腫瘤反應(yīng)。PD-1:PD-L1/2 通路還參與調(diào)節(jié)自身免疫反應(yīng)，使這些蛋白質(zhì)成為多種癌癥以及多發(fā)性硬化癥、關(guān)節(jié)炎、狼瘡和 I 型糖尿病的有希望的治療靶點(diǎn)。       LAG-3又名CD223是一種免疫檢查點(diǎn)受體蛋白，主要表達(dá)在活化的T細(xì)胞、NK細(xì)胞、B細(xì)胞和漿細(xì)胞樣樹突細(xì)胞。研究表明，通過與MHC II分子的結(jié)合，LAG3可降低T細(xì)胞的活性；與此同時(shí)，LAG3還可增強(qiáng)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)的抑制作用。使用治療性抗體阻斷LAG3，可解除對(duì)T細(xì)胞的抑制，增強(qiáng)T細(xì)胞的免疫應(yīng)答反應(yīng)，因此針對(duì)其開發(fā)的抗體藥物已經(jīng)成為繼CTLA-4、PD-1/L1后第三種進(jìn)入臨床的免疫檢查點(diǎn)靶點(diǎn)抑制劑。       研究表明在T細(xì)胞耗竭的腫瘤免疫微環(huán)境中，經(jīng)?？梢园l(fā)現(xiàn)LAG-3與PD-1共表達(dá)，并且在對(duì)PD-1抗體耐藥的腫瘤侵潤(rùn)T細(xì)胞中LAG3表達(dá)顯著高于不耐藥的腫瘤侵潤(rùn)T細(xì)胞，而在小鼠模型上同時(shí)阻斷LAG3以及PD-1/L1兩個(gè)靶點(diǎn)，小鼠生存期更長(zhǎng)，腫瘤負(fù)荷更少，因此提示人們同時(shí)抑制LAG3&PD-1/L1通路可能存在協(xié)同效應(yīng)，并且可能有助于克服PD-1/L1耐藥。因此，從目前公布的數(shù)據(jù)和臨床實(shí)驗(yàn)方案來看，在研的LAG3抑制劑多采用和PD-1/L1聯(lián)合用藥或者直接開發(fā)針對(duì)PD1/L1及LAG3的雙抗藥物。
II. Background
PD1 LAG3 Dual Effector Reporter Cell 報(bào)告基因藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) PD1&LAG3 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，原理見下圖所示。 Figure 1. PD1 LAG3 Dual Effector Reporter Cell 細(xì)胞模型原理圖
II. Introduction
Expressed gene:	PD1、LAG3
Stability:	32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium:	90% FBS+10% DMSO
Culture Medium:	RPMI-1640+10%FBS+1ug/ml puromycin+800ug/ml hygromycin+10ug/ml blasticidin
Mycoplasma Testing:	Negative
Storage:	Liquid nitrogen
Application(s):	Functional(Report Gene) Assay
III. Representative Data

Figure 2. PD-1/LAG3 Dual Effector Reporter Cell constitutively expressing PD1 and LAG3.

Figure 3. Dose Response of Blocking Antibodies in PD-1 LAG3 Dual Effector Reporter Cells (C15) With PD-L1 MHCII APC Cells.